β-1,4-Gal-T4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407251-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β-1,4-Gal-T4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase β-1,4-Gal-T4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase β-1,4-Gal-T4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para B4GALT4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β-1,4-Gal-T4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407251-NIC | 20 µg | $410.00 |
B4GALT4 codifica a β-1,4-galactosiltransferase 4 humana (β-1,4-Gal-T4), uma glicosiltransferase residente no Golgi que transfere galactose para N-acetilglicosamina, gerando glicanos galactosilados com ligação β1,4 em glicoproteínas e glicolipídios. Por meio de sua contribuição para o processamento de N-glicanos e a extensão de lactosamina, a β-1,4-Gal-T4 influencia o tráfego de proteínas dependente de glicanos, a organização de receptores na superfície celular e interações célula–célula mediadas por lectinas. A galactosilação β1,4 alterada é frequentemente estudada no contexto de programas de glicosilação desregulados que moldam a sinalização, a adesão e o reconhecimento imune em estados celulares associados a doenças. Assim, B4GALT4 é relevante para investigações mecanísticas das vias de glicosilação no Golgi e de como a remodelação de glicanos afeta o fenótipo celular.
β-1,4-Gal-T4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus B4GALT4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de B4GALT4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função B4GALT4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com B4GALT4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.