β-1,4-Gal-T4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407251

Visão geral

B4GALT4 codifica a β-1,4-Gal-T4, uma β-1,4-galactosiltransferase residente no Golgi que transfere galactose para N-acetilglucosamina, formando unidades de lactosamina do tipo II em glicanos N- e O-ligados e em glicolipídios. Por meio de sua contribuição para a glicosilação, a β-1,4-Gal-T4 influencia o dobramento de proteínas, o tráfego intracelular, o tempo de permanência de receptores e as interações célula–célula ou célula–matriz mediadas por proteínas ligantes de glicanos. Alterações na galactosilação e na extensão de lactosamina podem remodelar redes de sinalização e o reconhecimento imune, conectando a remodelação de glicanos dependente de B4GALT4 a processos relevantes para doenças, como inflamação e comportamento de células tumorais. Como parte da rede mais ampla de glicosiltransferases, o B4GALT4 ajuda a definir a composição do glicoma da superfície celular, o que impacta programas de adesão, migração e diferenciação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO β-1,4-Gal-T4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene B4GALT4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do B4GALT4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do B4GALT4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína β-1,4-Gal-T4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de B4GALT4 para a investigação da sinalização de β-1,4-Gal-T4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) B4GALT4 críticos para a função β-1,4-Gal-T4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos B4GALT4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo β-1,4-Gal-T4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo β-1,4-Gal-T4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus B4GALT4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo β-1,4-Gal-T4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR β-1,4-Gal-T4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia B4GALT4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo B4GALT4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.