α1D-AR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402904-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1D-ARO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α1D-AR (h) e o Plasmídeo Double Nickase α1D-AR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADRA1D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α1D-AR Anticorpo (F-10): sc-390884
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1D-AR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402904-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α1D-AR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402904-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADRA1D codifica o recetor adrenérgico humano α1D (α1D-AR), um recetor acoplado à proteína G (GPCR) que sinaliza preferencialmente através de Gq/11 para ativar a fosfolipase C, aumentar o Ca2+ intracelular e estimular programas transcricionais dependentes de PKC. O α1D-AR contribui para a contratilidade do músculo liso e para o tónus vascular e modula a sinalização MAPK/ERK a jusante, a atividade de canais iónicos e a expressão génica dependente de Ca2+. A atividade do recetor integra sinais de catecolaminas em redes de sinalização autónoma e pode influenciar programas de proliferação e remodelação celular em tecidos responsivos. A sinalização adrenérgica desregulada envolvendo o ADRA1D tem sido investigada na fisiologia cardiovascular e urogenital e em contextos mais amplos em que a sinalização de Ca2+ mediada por GPCR afeta a inflamação e transições de estado celular.
α1D-AR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADRA1D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADRA1D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADRA1D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADRA1D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.