Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
α1D-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419022
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1D-AR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico α1D-AR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α1D-AR Anticorpo (F-10): sc-390884
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1D-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419022 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Adra1d codifica o receptor adrenérgico α1D de camundongo (α1D-AR), um receptor acoplado à proteína G que se acopla principalmente à Gq/11 para estimular a sinalização da fosfolipase C, a produção de fosfatos de inositol, a mobilização de Ca2+ intracelular e a ativação de PKC. Por meio dessas vias, o α1D-AR influencia a contração do músculo liso, o tônus vascular e do trato urinário e uma regulação autonômica mais ampla, com efeitos a jusante na sinalização MAPK/ERK e em programas transcricionais. A expressão de Adra1d e a dinâmica de sua sinalização são frequentemente examinadas no contexto da responsividade adrenérgica específica de tecido e das contribuições de subtipos de receptores para a homeostase fisiológica. A sinalização desregulada de GPCRs adrenérgicos tem sido associada a fenótipos cardiometabólicos e neurocomportamentais em modelos pré-clínicos, tornando o Adra1d um alvo relevante para estudos mecanísticos de vias responsivas ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α1D-AR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adra1d em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adra1d, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adra1d na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α1D-AR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adra1d para a investigação da sinalização de α1D-AR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adra1d críticos para a função α1D-AR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adra1d para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo α1D-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo α1D-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adra1d. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo α1D-AR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR α1D-AR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adra1d para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adra1d definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.