α1B-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419020
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1B-AR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico α1B-AR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1B-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419020 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Adra1b codifica o receptor adrenérgico α1B (α1B-AR) do camundongo, um receptor acoplado à proteína G que se acopla preferencialmente a Gq/11 para estimular a sinalização da fosfolipase Cβ, aumentando a liberação de Ca2+ mediada por IP3 e a ativação de PKC dependente de diacilglicerol. Por meio dessas vias, o α1B-AR regula o tônus do músculo liso, a neurotransmissão e a excitabilidade celular, e pode acionar programas MAPK/ERK a jusante que influenciam a expressão gênica e respostas adaptativas. Em contextos neurais e cardiovasculares, a sinalização de receptores adrenérgicos se cruza com circuitos de resposta ao estresse e com a regulação autonômica, ligando Adra1b a fenótipos relevantes para hipertensão, características neuropsiquiátricas e desregulação adrenérgica em modelos de doença. Elucidar a função do α1B-AR dá suporte a estudos mecanísticos de viés de sinalização de GPCR, “cross-talk” entre receptores e controle transcricional dependente de cálcio.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α1B-AR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adra1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adra1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adra1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α1B-AR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adra1b para a investigação da sinalização de α1B-AR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adra1b críticos para a função α1B-AR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adra1b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo α1B-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo α1B-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adra1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo α1B-AR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR α1B-AR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adra1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adra1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.