α-S1-casein CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419847

概要

Csn1s1 は、マウスの α-S1-カゼインをコードしている。α-S1-カゼインは乳に分泌される主要なリン酸化タンパク質で、分化した乳腺上皮細胞で合成され、ER–ゴルジ体の分泌経路を介して輸送・分泌される。カゼインミセルの中核成分として、α-S1-カゼインはミセルの組み立てやカルシウム／リン酸の取り扱いに寄与し、授乳期における効率的な栄養供給を支える。Csn1s1 の発現は泌乳ホルモンによって強く制御され、下流の JAK2/STAT5 経路およびプロラクチン応答性の転写プログラムにより、乳腺の分化が協調的に調節される。カゼイン遺伝子の制御変化は、乳腺上皮細胞の状態、分泌ストレス応答、ならびに乳汁分泌に関連する表現型を反映する指標として利用され、乳腺（乳房）生物学の研究モデルで広く用いられている。

α-S1-casein CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCsn1s1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Csn1s1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Csn1s1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、α-S1-caseinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、α-S1-caseinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Csn1s1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• α-S1-caseinの機能に不可欠なCsn1s1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Csn1s1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• α-S1-casein CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびα-S1-casein CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Csn1s1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  α-S1-casein HDRプラスミド（m）および α-S1-casein HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCsn1s1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCsn1s1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。