α-internexin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402920

개요

INA는 신경계 중간섬유 단백질인 α-인터넥신(α-internexin)을 암호화하며, 다른 뉴로필라멘트 소단위들과 함께 필라멘트 네트워크를 형성함으로써 세포골격 구조와 축삭 굵기(axonal caliber)에 기여합니다. α-인터넥신은 발달기 및 성숙 뉴런에서 중간섬유 시스템을 조직하여 신경돌기(neurite) 성장, 축삭 안정성, 세포내 수송을 지원합니다. INA 발현 변화나 필라멘트 조직 이상을 포함한 중간섬유 역학의 조절 이상은 뉴런 취약성, 축삭병증(axonopathy), 단백질 응집과 연관된 신경퇴행성 과정의 맥락에서 자주 연구됩니다. 뉴런에 풍부한 구조 단백질로서 α-인터넥신은 신경분화와 세포골격 재형성 연구에서 표지자이자 기전 분석을 위한 출발점으로 널리 활용됩니다.

α-internexin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 INA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 INA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 INA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 α-internexin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 α-internexin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 INA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• α-internexin 기능에 중요한 INA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 INA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• α-internexin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 α-internexin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 INA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  α-internexin HDR 플라스미드 (h) 및 α-internexin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 INA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 INA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.