α-gal A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m2): sc-419046-KO-2

개요

Gla는 마우스 α-갈락토시다아제 A(α-gal A)를 암호화하며, 이는 라이소좀의 엑소글리코시다아제로서 글리코스핑고지질 및 관련 당결합체의 말단 α-갈락토실 잔기를 제거합니다. 이러한 활성은 글리코스핑고지질 분해 경로를 통해 라이소좀 분해 대사와 막 지질 항상성을 뒷받침하며, 라이소좀 기능을 오토파지 및 엔도라이소좀 수송과 같은 세포 품질 관리 과정과 연결합니다. α-gal A 기능의 장애는 전통적으로 당지질 축적과 라이소좀 저장 질환 양상과 연관되어 있어, Gla는 대사 스트레스 반응과 소기관 기능 이상을 연구하는 데 관련성 높은 표적입니다. 마우스 모델에서 Gla를 교란하면 지질 회전율 변화가 염증, 신호전달, 그리고 세포 유형별 라이소좀 부담에 대한 취약성에 어떤 영향을 미치는지 규명하는 데 활용할 수 있습니다.

α-gal A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)는 mouse 세포주에서 Gla 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gla 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gla의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 α-gal A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 α-gal A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gla 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• α-gal A 기능에 중요한 Gla 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gla 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• α-gal A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 α-gal A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gla 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  α-gal A HDR 플라스미드 (m) 및 α-gal A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gla 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gla 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.