α-actinin-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m2): sc-430958-KO-2

개요

Actn1은 Ca2+ 비의존성 액틴 결합 단백질인 α-액티닌-1을 암호화하며, 필라멘트성 액틴을 가교(crosslink)하여 세포 피질(cortical) 액틴 네트워크, 스트레스 섬유, 그리고 접착과 연관된 세포골격 구조를 조직화합니다. 생쥐 세포에서 α-액티닌-1은 Rho 계열 GTPase와 같은 신호 허브와 액틴 리모델링을 조율함으로써, 인테그린에 연결된 초점접착(focal adhesion) 역동성, 기계적 신호전달(mechanotransduction), 그리고 세포 이동을 지지합니다. 세포골격 장력과 막 안정성을 유지하는 역할을 통해 ACTN1은 혈소판 생성과 지혈 기능 연구에서도 중요한데, 액틴 구조가 변하면 전(前)혈소판(proplatelet) 형성과 세포골격의 탄성/내구성이 교란될 수 있습니다. α-액티닌-1 기능의 이상 조절은 유전성 혈소판 질환 및 접착과 조직 구조를 포함하는 더 넓은 표현형과 연관되어 왔으며, 따라서 Actn1은 세포골격 구동 질병 기전을 모델링하기 위한 유용한 표적입니다.

α-actinin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)는 mouse 세포주에서 Actn1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Actn1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Actn1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 α-actinin-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 α-actinin-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Actn1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• α-actinin-1 기능에 중요한 Actn1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Actn1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• α-actinin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 α-actinin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Actn1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  α-actinin-1 HDR 플라스미드 (m) 및 α-actinin-1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Actn1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Actn1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.