α4a Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400016-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α4a TubulinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α4a Tubulin (h) e o Plasmídeo Double Nickase α4a Tubulin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TUBA4A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α4a Tubulin Anticorpo (MH-17): sc-134241
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α4a Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400016-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α4a Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400016-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA4A codifica a tubulina α4a, uma isoforma central de α-tubulina que forma heterodímeros com a β-tubulina para construir microtúbulos necessários à organização do citoesqueleto, ao transporte intracelular e à dinâmica do fuso mitótico. A remodelação dos microtúbulos, impulsionada pela composição de isoformas de tubulina e por modificações pós-traducionais, influencia a polaridade celular, o tráfego vesicular e o crescimento de neuritos por meio de vias que coordenam proteínas motoras e proteínas associadas a microtúbulos. Alterações na homeostase da tubulina e na dinâmica dos microtúbulos estão implicadas em fenótipos neurodegenerativos e em defeitos no transporte axonal, e variações em TUBA4A foram associadas, em estudos genéticos, à suscetibilidade a doenças do neurónio motor. Como resultado, TUBA4A é frequentemente investigado em modelos de respostas a stress do citoesqueleto, morfogénese neuronal e sensibilidade a compostos que têm os microtúbulos como alvo.
α4a Tubulin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TUBA4A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TUBA4A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TUBA4A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TUBA4A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.