Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
YY2 Plasmide Double Nickase (m): sc-437263-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- YY2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il YY2 Double Nickase Plasmid (m) e il YY2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Yy2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: YY2 Antibody (A-5): sc-377008
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
YY2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-437263-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Yy2 codifica YY2, un fattore di trascrizione a dita di zinco C2H2 correlato a YY1, che si lega a elementi di DNA ricchi in GC e modula l’attività dei promotori per plasmare programmi di espressione genica. YY2 è stato implicato nel controllo trascrizionale associato all’organizzazione della cromatina, alla regolazione dello sviluppo e a reti geniche legate al ciclo cellulare, nelle quali può agire, a seconda del contesto, da attivatore o repressore. Attraverso queste funzioni regolatorie, Yy2 offre uno strumento per studiare i circuiti trascrizionali e le dinamiche di legame su scala genomica che influenzano l’identità cellulare e le risposte allo stress. La disregolazione dei programmi trascrizionali della famiglia YY è rilevante in modelli di proliferazione e differenziamento aberranti, a supporto di Yy2 come bersaglio di ricerca in studi meccanicistici della regolazione genica.
YY2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Yy2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Yy2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Yy2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Yy2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.