WRN Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423724-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WRNO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase WRN (m) e o Plasmídeo Double Nickase WRN (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Wrn. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WRN Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423724-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WRN Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423724-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Wrn de camundongo codifica a WRN, uma helicase/exonuclease de DNA da família RecQ que preserva a estabilidade do genoma ao coordenar a replicação do DNA, a recombinação e múltiplos processos de reparo do DNA. A WRN participa das respostas ao estresse de replicação e do reparo de quebras de dupla fita do DNA, atuando em vias que incluem recombinação homóloga, união de extremidades não homólogas e manutenção dos telômeros. A interrupção da atividade de WRN está associada ao aumento da instabilidade cromossômica, à alteração da sinalização de checkpoints do ciclo celular e a fenótipos de senescência celular precoce. Essas funções tornam Wrn um gene modelo amplamente utilizado para estudar mecanismos de manutenção do genoma associados ao envelhecimento e os circuitos de resposta a danos no DNA.
WRN O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Wrn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Wrn. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Wrn. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Wrn interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.