Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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WDR5 Plasmide Double Nickase (h): sc-402425-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- WDR5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il WDR5 Double Nickase Plasmid (h) e il WDR5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira WDR5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: WDR5 Antibody (G-9): sc-393080
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
WDR5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402425-NIC | 20 µg | $410.00 |
WDR5 (WD repeat domain 5) codifica una proteina scaffold fondamentale associata alla cromatina, che si lega all’istone H3 e coordina l’assemblaggio dei complessi COMPASS/MLL responsabili della metilazione di H3K4 nei promotori attivi. Attraverso queste interazioni, WDR5 regola programmi trascrizionali che controllano la progressione del ciclo cellulare, la specificazione di linea e il mantenimento di stati simil-staminali; inoltre interagisce con l’allungamento trascrizionale mediato dall’RNA polimerasi II e con la funzione degli enhancer. WDR5 partecipa al crosstalk epigenetico con l’espressione genica dipendente da MYC e con altri regolatori della cromatina che modellano l’accessibilità cromatinica globale. La disregolazione del rimodellamento della cromatina e della metilazione di H3K4 legati a WDR5 è stata associata ad alterazioni dell’espressione genica nello sviluppo e a circuiti trascrizionali oncogenici in molteplici contesti patologici.
WDR5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus WDR5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di WDR5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di WDR5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con WDR5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.