Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
WASP Antibody (B-9): sc-13139. Western blot analysis of WASP expression in HeLa (A), K-562 (B), untreated HCT-116 (C), chemically-treated HCT-116 (D) and chemically-treated HCT-116 (E) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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WASP双切口酶质粒(h): sc-400712-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- WASP 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- WASP双切酶质粒（h）和WASP双切酶质粒（h2）编码针对WAS的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：WASP: sc-5300，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
WASP双切口酶质粒(h) | sc-400712-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WASP双切口酶质粒(h2) | sc-400712-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WAS 基因编码 Wiskott–Aldrich 综合征蛋白（WASP），是一种造血系统特异的肌动蛋白细胞骨架重塑调控因子，能够将受体信号与依赖 Arp2/3 的分支状肌动蛋白聚合连接起来。WASP 通过与 Cdc42、磷脂酰肌醇类分子以及含 SH3 结构域的适配蛋白相互作用，在白细胞中协调免疫突触形成、细胞迁移、吞噬作用和内吞运输等过程。WASP 的活性整合了 T 细胞受体、B 细胞受体、Fc 受体和趋化因子受体下游的多条通路，从而塑造淋巴细胞激活与先天免疫反应。WAS 的失调与免疫缺陷及血小板生物学异常相关，因此成为研究人类免疫细胞中细胞骨架调控机制的重要靶点。
WASP 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 WAS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对WAS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏WAS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了WAS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。