Uroguanylin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404519-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UroguanylinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Uroguanylin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Uroguanylin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GUCA2B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Uroguanylin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404519-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Uroguanylin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404519-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GUCA2B codifica a uroguanilina, um hormônio peptídico secretado que ativa o receptor guanilato ciclase C (GUCY2C) em células epiteliais intestinais, elevando o cGMP intracelular. Esse eixo de sinalização regula o transporte de eletrólitos e água, a função de barreira epitelial e a homeostase da mucosa por meio de vias dependentes de cGMP que influenciam a atividade de canais iônicos e quinases a jusante. A uroguanilina é parte integrante da comunicação do eixo intestino–rim e contribui para a natriurese renal e para a fisiologia relacionada à pressão arterial via sinalização por cGMP. A desregulação da sinalização GUCA2B/GUCY2C–cGMP tem sido associada a alterações na secreção intestinal e na integridade da barreira, com implicações para condições inflamatórias e para a patobiologia epitelial relevante à pesquisa em doenças colorretais.
Uroguanylin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GUCA2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GUCA2B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GUCA2B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GUCA2B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.