Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TTP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400722-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TTPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TTP (h) e o Plasmídeo Double Nickase TTP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ZFP36. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TTP Anticorpo (A-8): sc-374305
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TTP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400722-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TTP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400722-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ZFP36 humano codifica a tristetraprolina (TTP), uma proteína de ligação ao RNA que reconhece elementos ricos em AU e promove a deadenilação e a degradação de mRNAs lábeis, restringindo assim a expressão de citocinas e de transcritos associados ao crescimento. A TTP integra o controle pós-transcricional com vias de sinalização inflamatória, incluindo TNF/NF-κB e a fosforilação regulada por MAPK, que modula sua atividade de ligação ao RNA e sua localização subcelular. Ao moldar programas de estabilidade de transcritos, a TTP influencia a ativação de macrófagos, respostas ao estresse e a progressão do ciclo celular. Alterações na expressão ou na função de ZFP36/TTP têm sido associadas à inflamação desregulada e a assinaturas de expressão gênica ligadas a tumores, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos de redes imunes e oncogênicas.
TTP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ZFP36 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ZFP36. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ZFP36. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ZFP36 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.