TRP2/DCT Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400334-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRP2/DCTO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRP2/DCT (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRP2/DCT (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DCT. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRP2/DCT Anticorpo (C-9): sc-74439
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRP2/DCT Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400334-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRP2/DCT Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400334-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A DCT (dopacromo tautomerase) humana, também conhecida como TRP2, é uma enzima melanosomal da via biossintética da eumelanina que catalisa a conversão de dopacromo em DHICA, moldando a composição do pigmento e o equilíbrio redox nos melanócitos. Sua expressão é regulada por programas de linhagem melanocítica, como a transcrição dependente de MITF, e se integra aos processos de biogênese e tráfego de melanossomos. A atividade da DCT influencia as respostas celulares ao estresse oxidativo e os estados de diferenciação, tornando-a relevante para estudos de biologia da pigmentação e função de melanócitos. A desregulação da expressão de DCT é frequentemente investigada no melanoma e em outros distúrbios associados a células pigmentares como um marcador de identidade de linhagem e de biologia tumoral.
TRP2/DCT O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DCT em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DCT. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DCT. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DCT interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.