TNFα-IP 8 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-411806

Panoramica

TNFAIP8 codifica la proteina 8 indotta da TNFα (TNFα-IP 8), un regolatore citoplasmatico della sopravvivenza cellulare e della segnalazione infiammatoria, indotto da TNFα e da altri stimoli immunitari. TNFα-IP 8 è stata collegata alla modulazione dell’apoptosi, delle risposte associate a NF-κB e di programmi adattativi allo stress che influenzano proliferazione cellulare, migrazione e omeostasi immunitaria. Un’espressione alterata di TNFAIP8 è stata riportata in molteplici contesti patologici, in particolare in firme trascrizionali associate a cancro e infiammazione. Di conseguenza, TNFAIP8 è frequentemente studiato come nodo di collegamento tra la segnalazione guidata dalle citochine e fenotipi quali la resistenza alla morte cellulare e cambiamenti nella motilità.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TNFα-IP 8 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TNFAIP8 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TNFAIP8 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TNFAIP8 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TNFα-IP 8.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TNFAIP8 per lo studio della segnalazione di TNFα-IP 8, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TNFAIP8 critici per la funzione di TNFα-IP 8
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TNFAIP8 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TNFα-IP 8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TNFα-IP 8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TNFAIP8. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TNFα-IP 8 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TNFα-IP 8 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TNFAIP8 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TNFAIP8 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.