TGFβ2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400496-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TGFβ2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TGFβ2 Double Nickase Plasmid (h) e il TGFβ2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TGFB2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TGFβ2 Antibody (H-6): sc-374659
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TGFβ2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400496-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TGFβ2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400496-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TGFB2 codifica il transforming growth factor beta 2 (TGFβ2), una citochina secreta che segnala attraverso recettori di tipo I/II con attività chinasi serina/treonina, attivando la trascrizione dipendente da SMAD2/3 e vie non canoniche come MAPK, PI3K/AKT e le GTPasi della famiglia Rho. TGFβ2 regola la proliferazione, la differenziazione e l’apoptosi cellulari, la modulazione immunitaria e il rimodellamento della matrice extracellulare, contribuendo allo sviluppo dei tessuti e all’omeostasi. Una segnalazione TGFB2/TGFβ2 deregolata è associata ad alterazioni delle transizioni epitelio-mesenchimali, al rimodellamento legato alla fibrosi, a programmi angiogenici e a fenotipi di evasione immunitaria osservati in diversi contesti patologici. In biologia del cancro e negli studi di rigenerazione, TGFB2 è spesso oggetto di indagine per i suoi ruoli nel dialogo stroma–tumore, nella deposizione di matrice e nella specificazione di linea cellulare.
TGFβ2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TGFB2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TGFB2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TGFB2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TGFB2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.