TFEB Lentiviral Activation Particles (h): sc-401388-LAC

転写因子EB（TFEB）は、リソソーム生合成とオートファジーのマスター制御因子であり、CLEARネットワークの発現を協調的に制御することで、プロテオスタシスの維持および栄養・酸化ストレスに対する細胞の適応を担います。TFEB活性は、mTORC1依存的なリン酸化と細胞質への滞留を含む栄養感知経路によって厳密に制御されており、ストレスにより核内移行が誘導されると、リソソーム—オートファジー関連遺伝子プログラムが駆動されます。さらにTFEBは、エンドリソソーム輸送、脂質分解、ミトコンドリア品質管理の制御を通じて、多様な細胞種における炎症シグナル伝達と代謝恒常性に影響を及ぼします。TFEBシグナルの破綻は、リソソーム病、神経変性疾患モデル、がん細胞の適応、心代謝機能障害などに関与するとされており、ヒト系で経路を解析するうえで有用な結節点となっています。

TFEB レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なTFEBの発現上昇を可能にします。

TFEB レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、TFEB転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性TFEBの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のTFEBゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。