Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SYT Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401575-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SYTO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SYT (h) e o Plasmídeo Double Nickase SYT (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SS18. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SYT Anticorpo (D-3): sc-390615
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SYT Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401575-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SYT Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401575-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SS18 (SYT) codifica uma subunidade central do complexo de remodelação de cromatina SWI/SNF (BAF) dependente de ATP, que regula a acessibilidade da cromatina e a transcrição dependente da RNA polimerase II. Ao coordenar a comunicação entre enhancers e promotores e programas de expressão gênica específicos de linhagem, SS18 ajuda a controlar a progressão do ciclo celular, a diferenciação e o padrão de desenvolvimento. Alterações na biologia de SS18 estão fortemente implicadas no sarcoma sinovial, no qual proteínas de fusão derivadas de translocações envolvendo SS18 reprogramam a composição do complexo BAF e suas saídas transcricionais. A desregulação da cromatina associada a SS18 também fundamenta estudos mais amplos sobre controle epigenético, dependências transcricionais oncogênicas e organização do genoma em células humanas.
SYT O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SS18 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SS18. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SS18. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SS18 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.