striatin Plasmide Double Nickase (h): sc-406215-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- striatin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il striatin Double Nickase Plasmid (h) e il striatin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira STRN. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: striatin Antibody (6): sc-136084
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
striatin Plasmide Double Nickase (h) | sc-406215-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
striatin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406215-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **STRN** codifica la **striatina**, una proteina di impalcatura legante la calmodulina all’interno del complesso **STRIPAK** (striatin-interacting phosphatase and kinase), che coordina la segnalazione associata a **PP2A**, la regolazione delle chinasi e l’assemblaggio di complessi multiproteici a livello delle membrane cellulari e dei siti di giunzione. Attraverso queste interazioni, la striatina contribuisce all’integrazione di segnali dipendenti dal calcio con vie che controllano la dinamica del citoscheletro, la polarità cellulare, il traffico vescicolare e le reti di segnalazione associate alla proliferazione. Alterazioni della funzione di **STRN/STRIPAK** sono state collegate a una trasduzione del segnale e a un’organizzazione delle giunzioni deregolate in contesti rilevanti per il rimodellamento delle vie oncogeniche e l’omeostasi specifica dei tessuti. Queste proprietà rendono **STRN** un bersaglio utile per analizzare il crosstalk tra vie mediato da proteine scaffold e l’equilibrio fosfatasi–chinasi nelle cellule umane.
striatin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus STRN nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di STRN. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di STRN. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con STRN interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.