Date published: 2026-7-10

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STAU1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402630-NIC

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Schede Tecniche
  • Specie Target: human
  • 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
  • STAU1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
  • Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
  • Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
  • Il STAU1 Double Nickase Plasmid (h) e il STAU1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira STAU1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
  • In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: STAU1 Antibody (C-4): sc-390820
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    STAU1 Plasmide Double Nickase (h)

    sc-402630-NIC
    20 µg
    $410.00

    STAU1 Plasmide Double Nickase (h2)

    sc-402630-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    STAU1 (proteina 1 legante l’RNA a doppio filamento Staufen) è una proteina legante l’RNA conservata che riconosce RNA strutturati e regola l’espressione genica post-trascrizionale attraverso la localizzazione, la stabilità e la traduzione dell’mRNA. È un fattore centrale nella degradazione dell’mRNA mediata da Staufen (SMD), collegando elementi di RNA a doppio filamento presenti nei trascritti bersaglio alle vie di turnover che modellano l’output del proteoma. STAU1 partecipa anche alla dinamica dei granuli ribonucleoproteici e alle risposte allo stress, influenzando il traffico dell’RNA e il controllo della traduzione nel citoplasma. Una deregolazione del metabolismo dell’RNA dipendente da STAU1 è stata implicata in alterazioni dell’omeostasi neuronale e muscolare ed è spesso studiata nel contesto della neurodegenerazione e dei disturbi associati ai granuli di RNA.

    STAU1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus STAU1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di STAU1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di STAU1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

    Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con STAU1 interrotto.

    Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.