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SREBP-1双切口酶质粒(m) | sc-423152-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Srebf1 基因编码固醇调节元件结合蛋白 1(SREBP-1),这是一种膜锚定型转录因子,可通过蛋白水解激活以驱动脂质生成相关基因程序。SREBP-1 通过调控 ACACA、FASN 和 SCD1 等酶的表达,协调脂肪酸与甘油三酯的合成,并将营养状态、胰岛素与 mTOR 信号与内质网的脂质感知整合在一起。通过控制膜生物发生与能量储存,SREBP-1 影响脂肪生成、肝脏脂质积累以及巨噬细胞的脂质处理。Srebf1/SREBP-1 活性失调常在代谢综合征、胰岛素抵抗、非酒精性脂肪性肝病以及肿瘤生长中脂质依赖性环节的模型研究中被重点关注。
SREBP-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Srebf1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Srebf1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Srebf1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Srebf1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。