Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SRA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404308-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SRAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SRA (h) e o Plasmídeo Double Nickase SRA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SRA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SRA Anticorpo (E-5): sc-393240
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SRA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404308-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SRA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404308-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SRA1 codifica o ativador de RNA do recetor de esteroides 1 (SRA), um co-regulador multifuncional de RNA e proteína que modula programas de transcrição controlados por recetores nucleares e outros fatores de transcrição. O SRA participa na remodelação da cromatina e na montagem de complexos de transcrição que influenciam a expressão génica responsiva a hormonas, acoplando a sinalização por esteroides a processos regulatórios mais amplos mediados por mecanismos epigenéticos e por RNA. Por meio destas atividades, o SRA1 está associado a vias que governam a diferenciação celular, a regulação metabólica e outputs transcricionais responsivos ao stress. Foi descrita expressão desregulada de SRA1/SRA em diversos contextos de doenças relacionadas com hormonas e com proliferação, o que sustenta a sua utilização como alvo mecanístico para dissecar perturbações em redes transcricionais.
SRA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SRA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SRA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SRA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SRA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.