Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SQSTM1/p62 Antibody (D-3): sc-28359. Western blot analysis of SQSTM1 expression in untreated HeLa (A), chemically-treated HeLa (B, C), untreated HCT-116 (D) and chemically-treated HCT-116 (E) whole cell lysates. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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SQSTM1/p62双切口酶质粒(m): sc-422075-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SQSTM1/p62 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SQSTM1/p62双切酶质粒（m）和SQSTM1/p62双切酶质粒（m2）编码针对Sqstm1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SQSTM1/p62: sc-48402，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SQSTM1/p62双切口酶质粒(m) | sc-422075-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SQSTM1/p62双切口酶质粒(m2) | sc-422075-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Sqstm1 编码 SQSTM1/p62，这是一种多功能适配蛋白，可通过其 UBA 结构域结合多聚泛素化货物，并借助 LIR 基序将其连接到 LC3 阳性的自噬体，从而协调选择性自噬与蛋白质稳态。SQSTM1/p62 还可作为支架蛋白组装 KEAP1–NRF2 氧化应激反应及 NF-κB 信号通路中的信号复合体，整合营养感知与炎症信号。作为应激诱导的枢纽分子，SQSTM1/p62 调控异常会影响自噬通量、聚集体清除以及线粒体质量控制——这些过程常在神经退行性疾病、代谢功能障碍与肿瘤生物学模型中被研究。其在泛素信号与相分离蛋白组装中的作用，使其成为研究蛋白毒性应激与先天免疫信号时的重要读出指标。
SQSTM1/p62 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Sqstm1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sqstm1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Sqstm1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Sqstm1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。