Plásmido Doble Nickase (m) Sprr1b: sc-423137-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Sprr1b consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sprr1b (m) y el plásmido de doble nickasa Sprr1b (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Sprr1b. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Sprr1b | sc-423137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Sprr1b | sc-423137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sprr1b (proteína pequeña rica en prolina 1B) es un precursor murino de la envoltura cornificada que se entrecruza mediante transglutaminasas durante la diferenciación terminal de los queratinocitos, contribuyendo a la formación de la barrera epidérmica y a la resistencia mecánica. Su expresión se induce aguas abajo de señales de estrés epitelial y de diferenciación, y se utiliza con frecuencia como marcador de programas de diferenciación escamosa que implican respuestas transcripcionales reguladas por EGFR/MAPK y AP-1. Más allá de la piel, Sprr1b puede sobreexpresarse en epitelios lesionados y tejidos en regeneración, lo que refleja funciones en la reparación de la barrera y la adaptación celular al daño. La expresión desregulada de la familia SPRR se ha asociado con estados cutáneos hiperqueratósicos e inflamatorios, así como con contextos de remodelación epitelial, lo que hace que Sprr1b sea relevante para estudios sobre disfunción de la barrera y biología del estrés epitelial.
Sprr1b El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Sprr1b en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Sprr1b. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Sprr1b. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Sprr1b alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.