Sprr1b Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423137-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sprr1bO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sprr1b (m) e o Plasmídeo Double Nickase Sprr1b (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sprr1b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sprr1b Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sprr1b Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sprr1b (small proline-rich protein 1B) é um precursor do envelope cornificado em camundongos que se torna reticulado por transglutaminases durante a diferenciação terminal de queratinócitos, contribuindo para a formação da barreira epidérmica e para a resiliência mecânica. Sua expressão é induzida a jusante de sinais de estresse epitelial e de diferenciação, e ela é frequentemente usada como marcador de programas de diferenciação escamosa que envolvem respostas transcricionais reguladas por EGFR/MAPK e AP-1. Além da pele, Sprr1b pode ser regulada positivamente em epitélios lesionados e em tecidos em regeneração, refletindo papéis no reparo da barreira e na adaptação celular ao dano. A expressão desregulada da família SPRR tem sido associada a estados cutâneos hiperqueratóticos e inflamatórios, bem como a contextos de remodelamento epitelial, tornando Sprr1b relevante para estudos de disfunção de barreira e biologia do estresse epitelial.
Sprr1b O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sprr1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sprr1b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sprr1b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sprr1b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.