SLUG Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400389-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SLUGO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SLUG (h) e o Plasmídeo Double Nickase SLUG (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SNAI2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SLUG Anticorpo (A-7): sc-166476
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SLUG Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400389-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLUG Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400389-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SNAI2 codifica o fator de transcrição com dedos de zinco SLUG, um regulador-chave da transição epitélio–mesênquima (EMT) que reprime genes epiteliais como CDH1 e remodela programas do citoesqueleto e de adesão para promover motilidade e plasticidade de estado celular. O SLUG integra sinais de vias do desenvolvimento e de resposta ao estresse, incluindo TGF-β, WNT/β-catenina, Notch e MAPK, para coordenar decisões de linhagem, sobrevivência e diferenciação. Na biologia humana, a atividade alterada de SNAI2 é frequentemente associada a fenótipos de progressão tumoral, programas transcricionais ligados à invasão e estados adaptativos à terapia, além de contribuir em contextos de crista neural e hematopoiese. Essas propriedades tornam o SLUG um alvo amplamente utilizado para dissecar o controle transcricional da EMT, a migração celular, características do tipo célula-tronco e respostas ao microambiente.
SLUG O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SNAI2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SNAI2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SNAI2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SNAI2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.