Sialyltransferase 7ACRISPR激活质粒(h): sc-406723-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Sialyltransferase 7A CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Sialyltransferase 7A CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Sialyltransferase 7A CRISPR 激活质粒 (h) 和 Sialyltransferase 7A CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 ST6GALNAC1 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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Sialyltransferase 7ACRISPR激活质粒(h) | sc-406723-ACT | 20 µg | $397.00 |
ST6GALNAC1 编码人类唾液酸转移酶 7A（Sialyltransferase 7A），这是一种定位于高尔基体的糖基转移酶，催化 O-糖链上 GalNAc（N-乙酰半乳糖胺）残基的 α2,6-唾液酸化，从而帮助塑造细胞表面及分泌蛋白中的黏蛋白型糖基化模式。通过调控末端唾液酸的呈递，它会影响多种依赖糖链的过程，包括蛋白稳定性、受体–配体相互作用，以及分泌途径中的凝集素介导信号传导。ST6GALNAC1 活性改变可导致唾液酸化糖表位组成发生偏移，并与细胞黏附及免疫识别情境的变化相关，因此在肿瘤相关糖基化与炎症微环境研究中具有重要意义。因而，该基因常被用于糖基化重塑、上皮分化以及细胞–基质通讯等通路层面的分析。
Sialyltransferase 7A CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ST6GALNAC1的表达。
Sialyltransferase 7A CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ST6GALNAC1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ST6GALNAC1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Sialyltransferase 7A表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ST6GALNAC1位点，并能够研究内源性位点上依赖于Sialyltransferase 7A的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ST6GALNAC1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Sialyltransferase 7A通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。