serum reponse factor /SRF Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-423154-LAC

O gene **Srf** de camundongo codifica o **serum response factor (SRF)**, um fator de transcrição do tipo MADS-box que se liga a elementos de resposta ao soro para coordenar a expressão de genes de resposta imediata com a dinâmica do citoesqueleto. O SRF integra sinais da remodelação de actina mediada por RhoA e das vias MAPK/ERK para regular programas que controlam proliferação, migração, diferenciação e respostas ao estresse. Por meio de interações com cofatores como myocardin e MRTFs, o SRF modula redes gênicas do músculo liso e do coração, bem como a transcrição neuronal dependente de atividade. A desregulação da sinalização de SRF tem sido associada a fenótipos anormais de remodelamento e crescimento em contextos cardiovasculares e neuromusculares, tornando-o um nó útil para estudos mecanísticos do controle transcricional em vias relevantes para doenças.

As Partículas de Ativação Lentivirais serum reponse factor /SRF (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Srf numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais serum reponse factor /SRF (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Srf, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de serum reponse factor /SRF. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Srf e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.