SENP5 Plasmide Double Nickase (h): sc-404428-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SENP5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SENP5 Double Nickase Plasmid (h) e il SENP5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SENP5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SENP5 Antibody (3C2): sc-293373
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SENP5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404428-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SENP5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404428-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **SENP5** codifica una proteasi specifica per SUMO che rimuove le modificazioni SUMO dai substrati proteici, modulando così il controllo SUMO-dipendente della stabilità delle proteine, della loro localizzazione e dell’assemblaggio di complessi macromolecolari. L’attività di SENP5 contribuisce al coordinamento della progressione del ciclo cellulare e degli eventi mitotici, con ruoli riportati in processi associati al centrosoma e al nucleolo e nel mantenimento della proteostasi durante lo stress cellulare. Regolando l’equilibrio tra SUMOilazione e deSUMOilazione, SENP5 influenza programmi trascrizionali e la segnalazione della risposta al danno al DNA, che determinano l’idoneità cellulare e l’integrità del genoma. Un’alterazione dell’attività della via SUMO, inclusa una funzione modificata della famiglia SENP, è stata associata a fenotipi proliferativi e a caratteristiche molecolari osservate in diversi contesti patologici, rendendo SENP5 un nodo utile per studi meccanicistici.
SENP5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SENP5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SENP5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SENP5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SENP5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.