Plásmido Doble Nickase (h) SENP5: sc-404428-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SENP5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SENP5 (h) y el plásmido de doble nickasa SENP5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SENP5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SENP5 Anticuerpo (3C2): sc-293373
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SENP5 | sc-404428-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SENP5 | sc-404428-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **SENP5** codifica una proteasa específica de SUMO que elimina modificaciones por SUMO de sustratos proteicos, ajustando así el control dependiente de SUMO sobre la estabilidad, la localización y el ensamblaje de complejos macromoleculares. La actividad de SENP5 contribuye a la coordinación de la progresión del ciclo celular y de los eventos mitóticos, con funciones descritas en procesos asociados al centrosoma y al nucléolo, y en el mantenimiento de la proteostasis durante el estrés celular. Al regular el equilibrio entre SUMOilación y desSUMOilación, SENP5 influye en programas transcripcionales y en la señalización de la respuesta al daño del ADN que determinan la aptitud celular y la integridad del genoma. La actividad desregulada de la vía de SUMO, incluida la alteración de la función de la familia SENP, se ha vinculado a fenotipos proliferativos y a características moleculares observadas en múltiples contextos de enfermedad, lo que convierte a SENP5 en un nodo útil para estudios mecanísticos.
SENP5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SENP5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SENP5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SENP5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SENP5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.