RBM35B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408008-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RBM35BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RBM35B (h) e o Plasmídeo Double Nickase RBM35B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ESRP2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RBM35B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM35B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ESRP2 (RBM35B) é uma proteína de ligação a RNA específica de células epiteliais que regula programas de splicing alternativo de pré‑mRNA envolvidos na polaridade celular, adesão e diferenciação. Ao modular a inclusão de éxons em redes ligadas à transição epitélio–mesênquima (EMT), a ESRP2 ajuda a manter a identidade epitelial e influencia as saídas de sinalização de vias como as de receptores tirosina‑quinase e as respostas transcricionais associadas ao TGF‑β. A expressão desregulada de ESRP2 ou sua atividade de splicing tem sido associada a alterações no uso de isoformas em modelos de progressão relacionados ao câncer e a perturbações no desenvolvimento epitelial e na função de barreira. Como reguladora de splicing, a ESRP2 oferece um ponto de entrada mecanístico para estudar fenótipos dependentes de isoforma, remodelação do transcriptoma e defeitos no processamento de RNA em sistemas celulares humanos.
RBM35B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ESRP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ESRP2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ESRP2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ESRP2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.