RBM24 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-410387

Panoramica

RBM24 (RNA binding motif protein 24) è una proteina legante l’RNA, arricchita nel muscolo, che regola l’espressione genica post-trascrizionale controllando lo splicing alternativo, la stabilità dell’mRNA e la localizzazione dei trascritti. Contribuisce alla differenziazione miogenica e all’organizzazione del sarcomero coordinando programmi di RNA specifici del muscolo e interagendo con i macchinari dello splicing e della traduzione. L’attività di RBM24 è stata collegata allo sviluppo del muscolo cardiaco e scheletrico, e un’alterata elaborazione dell’RNA dipendente da RBM24 è associata a fenotipi correlati alla cardiomiopatia e a stati di differenziazione deregolati. Poiché RBM24 modula la scelta delle isoforme e il destino dell’RNA, è spesso studiata in vie che governano l’assemblaggio del citoscheletro, l’accoppiamento eccitazione–contrazione e il rimodellamento responsivo allo stress.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RBM24 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RBM24 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RBM24 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RBM24 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RBM24.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RBM24 per lo studio della segnalazione di RBM24, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni RBM24 critici per la funzione di RBM24
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RBM24 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal RBM24 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal RBM24 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RBM24. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal RBM24 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR RBM24 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RBM24 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RBM24 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.