PU.1/Spi1慢病毒激活颗粒(h): sc-400547-LAC
- 针对种属：human
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- PU.1/Spi1 慢病毒激活颗粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- PU.1/Spi1慢病毒激活颗粒(h)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 PU.1/Spi1 慢病毒激活质粒 (h) 和 PU.1/Spi1 慢病毒激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 靶向 SPI1 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：PU.1/Spi1 Antibody (C-3): sc-390405，通过WB、IF或IHC分析
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PU.1/Spi1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400547-LAC | 200 µl | $455.00 |
SPI1 编码 ETS 家族转录因子 PU.1（Spi1）。PU.1 是决定细胞谱系的造血分化关键调控因子，统筹髓系细胞与 B 细胞的发育。PU.1 通过结合 ETS 基序来调控先天免疫信号传导、抗原呈递以及吞噬细胞功能等相关程序，并整合来自细胞因子/JAK-STAT、NF-κB 和 Toll 样受体通路的信号输入。其具有剂量敏感性的活性可塑造染色质可及性与转录网络，从而决定祖细胞的谱系承诺，并调控巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞的成熟。SPI1 的表达或活性失调与血液系统恶性肿瘤及免疫功能障碍有关，因此它是研究白血病发生相关转录回路与炎症基因调控的关键节点。
PU.1/Spi1 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 SPI1 表达。
PU.1/Spi1 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在SPI1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性PU.1/Spi1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 SPI1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。