
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PSMD7CRISPR激活质粒(h) | sc-405949-ACT | 20 µg | $397.00 |
PSMD7(蛋白酶体 26S 亚基、非 ATP 酶 7)是人 26S 蛋白酶体 19S 调节颗粒的核心组成部分,参与依赖泛素的蛋白质周转并维持细胞蛋白质稳态。通过支持对多聚泛素化底物的识别与处理,PSMD7 影响与细胞周期推进、应激反应和蛋白质质量控制相关的通路,包括内质网相关降解(ERAD)以及由蛋白酶体介导的信号转导事件。蛋白酶体调节亚基活性的改变会重塑关键调控蛋白的降解,从而影响转录程序和对蛋白毒性应激的适应性反应。包括 PSMD7 在内的泛素–蛋白酶体系统(UPS)组分失调,常在增殖信号、基因组维护以及疾病相关的蛋白质稳态失衡研究中被重点关注。
PSMD7 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PSMD7的表达。
PSMD7 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的PSMD7基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于PSMD7转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性PSMD7表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的PSMD7位点,并能够研究内源性位点上依赖于PSMD7的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PSMD7表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PSMD7通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。