PPP2R3A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402433-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PPP2R3AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PPP2R3A (h) e o Plasmídeo Double Nickase PPP2R3A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PPP2R3A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PPP2R3A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402433-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PPP2R3A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402433-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPP2R3A codifica a PR130, uma subunidade reguladora B″ da proteína fosfatase 2A (PP2A) que ajuda a direcionar a montagem do holoenzima PP2A, sua localização subcelular e a seleção de substratos. Por meio da desfosforilação mediada por PP2A, PPP2R3A influencia o controle dependente de fosforilação da progressão do ciclo celular, da organização do citoesqueleto e de cascatas de transdução de sinais que integram entradas conduzidas por quinases. Alterações na regulação da PP2A estão amplamente associadas à desorganização da sinalização de crescimento e de resposta ao estresse, e mudanças na expressão ou na função de PPP2R3A têm sido investigadas no contexto do redirecionamento de vias oncogênicas e de outros mecanismos de doença centrados na fosforilação. Como resultado, PPP2R3A é frequentemente estudado para entender como a especificidade da PP2A molda as saídas das vias a jusante e os fenótipos celulares.
PPP2R3A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PPP2R3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PPP2R3A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PPP2R3A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PPP2R3A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.