PP2B-Aα CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422383

개요

Ppp3ca는 단백질 인산가수분해효소 2B(PP2B-Aα/칼시뉴린)의 촉매 Aα 소단위를 암호화하며, 이는 Ca²⁺/칼모듈린 의존성 세린/트레오닌 인산가수분해효소로서 세포 내 칼슘 신호를 전사 프로그램과 세포골격 프로그램에 연결합니다. 마우스 세포에서 칼시뉴린은 NFAT 전사인자와 같은 핵심 기질을 탈인산화하여 칼슘 의존적 유전자 발현, 면역 신호전달, 그리고 시냅스 가소성을 포함한 활동 의존적 신경 과정에 영향을 미칩니다. PP2B-Aα는 이온 채널 조절, 미토콘드리아 및 대사 적응, 스트레스 반응성 신호 네트워크를 조절하는 경로에도 관여합니다. 칼시뉴린 활성이 비정상적으로 조절되면 실험 모델에서 면역세포 활성의 변화, 신경발달 및 신경퇴행성 표현형, 그리고 심장·골격근의 부적응성 재형성과 연관되는 것으로 보고되었습니다.

PP2B-Aα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ppp3ca 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ppp3ca 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ppp3ca의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PP2B-Aα 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PP2B-Aα 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ppp3ca 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PP2B-Aα 기능에 중요한 Ppp3ca 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ppp3ca 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PP2B-Aα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PP2B-Aα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ppp3ca 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PP2B-Aα HDR 플라스미드 (m) 및 PP2B-Aα HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ppp3ca 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ppp3ca 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.