pNPP Substrate Buffer

O tampão de substrato pNPP (p-nitrofenil fosfato) é um componente crucial utilizado em vários ensaios enzimáticos na investigação bioquímica e de biologia molecular. Este tampão facilita a deteção e quantificação da atividade enzimática através da conversão de pNPP em p-nitrofenol pela ação de enzimas específicas. Na investigação, o tampão de substrato pNPP é normalmente utilizado em ensaios concebidos para medir a atividade das enzimas fosfatases. As fosfatases catalisam a hidrólise dos grupos fosfato dos substratos e a sua atividade pode ser quantificada através da monitorização da libertação de p-nitrofenol, que produz uma cor amarela após a desfosforilação. Esta alteração colorimétrica é facilmente detetável utilizando técnicas espectrofotométricas, permitindo uma quantificação precisa da atividade enzimática. Além disso, o tampão de substrato pNPP é utilizado em ensaios de rastreio de elevado rendimento para identificar inibidores ou activadores de enzimas fosfatases. Ao medir a taxa de produção de p-nitrofenol na presença de vários compostos, os investigadores podem identificar moléculas que modulam a atividade da fosfatase, fornecendo informações sobre as vias de sinalização celular e potenciais alvos.