plexin-C1 Plasmide Double Nickase (m): sc-424930-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- plexin-C1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il plexin-C1 Double Nickase Plasmid (m) e il plexin-C1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Plxnc1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: plexin-C1 Antibody (B-8): sc-390216
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
plexin-C1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424930-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Plxnc1 codifica la plexina-C1, un recettore delle semaforine che trasduce segnali guida extracellulari in rimodellamento del citoscheletro e in cambiamenti dell’adesione e della motilità cellulare. La segnalazione della plexina-C1 si integra con vie regolate da piccole GTPasi, influenzando la dinamica dell’actina, le interazioni dipendenti dalle integrine e programmi di migrazione direzionale che modellano l’organizzazione dei tessuti. In contesti immunitari e stromali, la plexina-C1 è stata associata alla regolazione del traffico cellulare e del patterning del microambiente, processi spesso studiati in modelli di infiammazione e biologia del cancro. La perturbazione di Plxnc1 è quindi utile per studiare reti di segnalazione guidate dalle semaforine, comportamenti dipendenti dal contatto e fenotipi associati alla migrazione nelle cellule di topo.
plexin-C1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Plxnc1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Plxnc1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Plxnc1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Plxnc1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.