PIWIL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418611-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PIWIL1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PIWIL1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PIWIL1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PIWIL1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PIWIL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418611-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PIWIL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418611-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PIWIL1 (HIWI) é uma proteína Argonauta da subfamília PIWI que se liga a piRNAs para regular o silenciamento gênico pós-transcricional, a repressão de transposons e o controle epigenético da estabilidade do genoma, particularmente em programas associados à linhagem germinativa. Por meio de interações com a maquinaria de biogênese de piRNAs e com fatores associados à cromatina, PIWIL1 contribui para a regulação guiada por RNA de elementos repetitivos e de alvos de mRNA, influenciando decisões de destino celular e diferenciação. A expressão desregulada de PIWIL1 tem sido relatada em múltiplos cânceres e é estudada no contexto da proliferação de células tumorais, fenótipos semelhantes a células-tronco e redes regulatórias de pequenos RNAs alteradas. Essas funções tornam PIWIL1 um alvo útil para investigar a biologia da via de piRNAs, a manutenção da integridade do genoma e mecanismos regulatórios mediados por RNA em células humanas.
PIWIL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PIWIL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PIWIL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PIWIL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PIWIL1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.