PCID2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406324

Panoramica

PCID2 (PCI domain containing 2) codifica una proteina contenente un dominio PCI, implicata nell’assemblaggio e nella regolazione di grandi complessi multiproteici che coordinano il metabolismo dell’RNA e il controllo dell’espressione genica. PCID2 è stata collegata a processi di regolazione post-trascrizionale, inclusi la sorveglianza e il turnover dell’mRNA, ed è studiata nel contesto di vie associate alla proteostasi che contribuiscono all’omeostasi cellulare. L’alterazione di questi processi può influenzare la progressione del ciclo cellulare, le risposte allo stress e i programmi di differenziamento modificando la stabilità dei trascritti e la produzione proteica. Reti deregolate di processamento dell’RNA e di controllo qualità sono frequentemente associate a stati oncogenici e ad altre malattie complesse, rendendo PCID2 un bersaglio utile per studi meccanicistici dei circuiti di regolazione genica.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO PCID2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene PCID2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del PCID2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto PCID2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina PCID2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di PCID2 per lo studio della segnalazione di PCID2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni PCID2 critici per la funzione di PCID2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di PCID2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal PCID2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal PCID2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus PCID2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal PCID2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR PCID2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia PCID2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio PCID2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.