p20-ARC Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426917-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p20-ARCO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase p20-ARC (m) e o Plasmídeo Double Nickase p20-ARC (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Arpc4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p20-ARC Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426917-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Arpc4 de camundongo codifica a p20-ARC, uma subunidade essencial do complexo Arp2/3, que impulsiona a nucleação e o ramificamento de filamentos de actina para gerar redes dinâmicas de actina cortical. Por meio de regulação coordenada por fatores promotores de nucleação, como WASP/WAVE, a jusante de GTPases da família Rho, a p20-ARC dá suporte à formação de lamelipódios, endocitose, tráfego vesicular e fagocitose, moldando a polaridade e a motilidade celulares. A desregulação da remodelação de actina dependente de Arp2/3 está associada a alterações na função de células imunes, prejuízo na morfogênese tecidual e comportamentos invasivos em modelos celulares relevantes para doenças, tornando o Arpc4 um nó central para investigar vias do citoesqueleto.
p20-ARC O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Arpc4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Arpc4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Arpc4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Arpc4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.