Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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P/Q-type Ca++ CP α1A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404267-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- P/Q-type Ca++ CP α1AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase P/Q-type Ca++ CP α1A (h) e o Plasmídeo Double Nickase P/Q-type Ca++ CP α1A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CACNA1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:P/Q-type Ca++ CP α1A Anticorpo (C-2): sc-390004
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
P/Q-type Ca++ CP α1A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404267-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
P/Q-type Ca++ CP α1A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404267-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1A codifica a subunidade α1A formadora do poro do canal de cálcio voltagem-dependente do tipo P/Q (CaV2.1), um dos principais mediadores do influxo de Ca2+ dependente de atividade em neurônios. A abertura do canal acopla a despolarização da membrana à liberação de neurotransmissores e modela padrões de disparo ao regular microdomínios presinápticos de cálcio e a exocitose de vesículas sinápticas. A atividade do CaV2.1 integra-se a vias de sinalização dependentes de cálcio, incluindo modulação dependente de calmodulina e redes downstream de quinases/fosfatases que ajustam a plasticidade sináptica. Variação genética ou disfunção em CACNA1A está ligada a fenótipos de doenças neurológicas que envolvem excitabilidade e transmissão sináptica alteradas, sustentando seu uso em estudos mecanísticos da função de circuitos neuronais.
P/Q-type Ca++ CP α1A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CACNA1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CACNA1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CACNA1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CACNA1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.