OSR1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-406034-LAC

O OSR1 humano (odd-skipped related transcription factor 1) codifica um fator de transcrição com dedo de zinco, ligante de DNA, que regula programas gênicos do desenvolvimento responsáveis pelo controle da diferenciação mesenquimal, da organogênese e do padrão de tecidos. A atividade do OSR1 influencia redes transcricionais envolvidas na especificação do destino celular e em interações epitélio–mesênquima, com efeitos a jusante sobre a organização da matriz extracelular e vias de sinalização de morfógenos. A expressão alterada de OSR1 tem sido associada a estados de diferenciação desregulados e foi estudada em contextos como anomalias urogenitais e craniofaciais congênitas, bem como reprogramação transcricional relacionada ao câncer. Essas características fazem do OSR1 um nó útil para investigar circuitos de controle de linhagem e a função de fatores de transcrição dependente do contexto em modelos celulares humanos.

As Partículas de Ativação Lentivirais OSR1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de OSR1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais OSR1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição OSR1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de OSR1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo OSR1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.