NGFR p75 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400552-NIC

NGFR codifica o receptor de neurotrofinas p75 (NGFR p75), um membro da superfamília de receptores de TNF que se liga a neurotrofinas e proneurotrofinas para modular a sobrevivência neuronal, a apoptose, o crescimento de neuritos e a remodelação sináptica. O NGFR p75 atua como um hub de sinalização dependente do contexto por meio de interações com correceptores como os receptores Trk e a sortilina, ativando vias que incluem NF-κB, JNK/c-Jun, a dinâmica do citoesqueleto mediada por RhoA e a sinalização por ceramida. Para além do sistema nervoso, o NGFR p75 influencia a biologia das células de Schwann, a regeneração axonal e estados celulares derivados da crista neural. A desregulação da sinalização e da expressão de NGFR tem sido associada a processos neurodegenerativos, respostas a lesões nervosas e à plasticidade e invasividade de células tumorais em vários contextos relevantes para o câncer, o que sustenta seu uso em estudos mecanísticos.

NGFR p75 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NGFR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NGFR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NGFR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NGFR interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.