NBR1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421827-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NBR1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NBR1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase NBR1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nbr1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NBR1 Anticorpo (4BR): sc-130380
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NBR1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421827-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NBR1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421827-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Nbr1** de camundongo codifica a **NBR1**, um receptor seletivo de autofagia que reconhece cargas ubiquitinadas por meio do seu domínio **UBA** e interage com as proteínas **LC3/GABARAP** via um motivo **LIR**, promovendo o direcionamento ao autofagossomo. A NBR1 atua em conjunto com **p62/SQSTM1** na agrefagia e contribui para a proteostase, o controle de qualidade de organelas e respostas ao estresse que modulam a sobrevivência celular e a sinalização inflamatória. Por meio de interações com vias de tráfego dependentes de ubiquitina e com as vias de autofagia–lisossomo, a NBR1 influencia a remoção de agregados proteicos e de componentes celulares danificados. A desregulação desses processos é relevante para pesquisas em neurodegeneração, estresse metabólico e biologia tumoral, nas quais fluxo autofágico prejudicado e sinalização anômala por ubiquitina são características comuns.
NBR1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nbr1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nbr1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nbr1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nbr1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.