MYH10 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401835

Panoramica

MYH10 codifica la miosina non muscolare IIB, una proteina motoria basata sull’actina che genera forza contrattile e supporta il rimodellamento del citoscheletro nelle cellule umane. Partecipa all’organizzazione della rete actomiosinica, alla migrazione cellulare, all’adesione, alla citocinesi e al mantenimento della polarità cellulare regolando le fibre di stress e la dinamica dell’anello contrattile. La funzione di MYH10 si intreccia con vie di segnalazione che controllano la morfogenesi e la meccanotrasduzione, collegando l’attività motoria ai cambiamenti della forma cellulare e dell’architettura tissutale. Un’espressione o un’attività alterata di MYH10 è stata associata a difetti nello sviluppo e nella divisione cellulare ed è spesso studiata nel contesto di dinamiche citoscheletriche disregolate in modelli di cancro e di malattie del neurosviluppo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MYH10 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MYH10 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MYH10 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MYH10 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MYH10.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MYH10 per lo studio della segnalazione di MYH10, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MYH10 critici per la funzione di MYH10
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MYH10 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal MYH10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal MYH10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MYH10. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal MYH10 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR MYH10 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MYH10 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MYH10 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.