MUTYH Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404076-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MUTYHO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MUTYH (h) e o Plasmídeo Double Nickase MUTYH (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MUTYH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MUTYH Anticorpo (C-6): sc-374571
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MUTYH Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404076-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MUTYH Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404076-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O MUTYH codifica uma DNA glicosilase que inicia o reparo por excisão de bases (BER) ao reconhecer e remover adeninas pareadas incorretamente com 8-oxo-7,8-diidroguanina, limitando assim transversões G:C→T:A causadas por dano oxidativo ao DNA. Essa atividade contribui para a manutenção do genoma durante a replicação e interage com fatores de BER a jusante e com processos de reparo associados à replicação para preservar a integridade cromossômica. A interrupção ou redução da função do MUTYH está ligada a maior carga mutacional e instabilidade genômica, com forte relevância para a predisposição a tumores colorretais e fenótipos relacionados a defeitos de reparo do DNA. Por isso, o MUTYH é frequentemente estudado em respostas ao estresse oxidativo, vias de prevenção de mutações e mecanismos que moldam assinaturas de mutação somática.
MUTYH O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MUTYH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MUTYH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MUTYH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MUTYH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.