Plasmide Double Nickase (h) Mucin 20: sc-415003-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Mucin 20 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mucin 20 Double Nickase (h) et le plasmide Mucin 20 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MUC20. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Mucin 20 | sc-415003-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Mucin 20 | sc-415003-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC20 code la mucine 20, une mucine associée à la membrane exprimée à la surface des épithéliums, où elle contribue à la structure du glycocalyx et à la modulation des interactions cellule–cellule et cellule–matrice. La mucine 20 a été impliquée dans la régulation de la signalisation des récepteurs à activité tyrosine kinase, notamment via la modulation de la voie MET/HGF, influençant la dynamique des voies MAPK/ERK et PI3K/AKT en aval. Par ses effets sur l’adhésion, la migration et les phénotypes liés à la fonction barrière, MUC20 est pertinente pour l’étude de la différenciation épithéliale et du remodelage tissulaire. Des altérations de l’expression de MUC20 ont été rapportées dans de multiples contextes pathologiques, ce qui en fait un levier moléculaire pour explorer, dans des modèles expérimentaux, le re-câblage des voies de signalisation et la pathobiologie épithéliale.
Mucin 20 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MUC20 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MUC20. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MUC20. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MUC20.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.