Plasmide Double Nickase (m) mitochondrial ferritin: sc-426664-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) mitochondrial ferritin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide mitochondrial ferritin Double Nickase (m) et le plasmide mitochondrial ferritin Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ftmt. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) mitochondrial ferritin | sc-426664-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Ftmt** code la ferritine mitochondriale, une protéine séquestrant le fer localisée dans la matrice mitochondriale, qui tamponne le fer redox-actif et aide à limiter la production d’espèces réactives de l’oxygène. En stockant le fer dans une coque de type ferritine, Ftmt contribue à l’homéostasie du fer mitochondrial, soutient l’intégrité de la chaîne respiratoire et influence des voies liées aux réponses au stress oxydant ainsi qu’au contrôle qualité des mitochondries. Des altérations de la gestion du fer mitochondrial ont été associées à la neurodégénérescence, à des phénotypes liés à l’anémie et au stress métabolique, ce qui fait de Ftmt un locus utile pour étudier la susceptibilité à la ferroptose et la dysfonction mitochondriale dans les cellules de mammifères. L’expression de Ftmt est également utilisée comme paramètre de lecture dans des modèles de surcharge en fer et de modifications du trafic cellulaire du fer associées à l’inflammation.
mitochondrial ferritin Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ftmt dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ftmt. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ftmt. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ftmt.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.